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1.工具概述:
利用多组KEGG富集分析结果表绘制多组富集气泡图。富集气泡图主要针对KEGG富集分析结果的可视化。本款小工具的绘图是从富集内容(涉及的Pathway)、富集基因数量、富集比例(富集因子)、富集显著性等四个维度进行展示。其制作原理非常简单,就是通过多组KEGG富集分析表中的信息,根据富集的显著性从高到低排序,选取显著性最高的前几个Pathway(一般是20),对其所富集的基因数目进行多维展示。简单来说,就是对表中的Pvalue值或Padjust值从小到大排序后,挑选对应的前N条Pathway,展示Pathway中富集的基因情况。
2.操作方法:
①任务名称:对本次小工具运行任务进行命名,方便后续任务查找及分析结果查看。
②分析组别:支持对2-5组的KEGG富集分析表进行多组气泡图绘制。
③KEGG富集分析表:支持两种类型的文件进行分析:Pvalue或者Padjust。上传文件格式为.txt形式,按照示例文件修改待分析KEGG富集分析表,以防运行失败。
示例文件1:输入Padjust类型的KEGG富集分析表,示例如下:
备注:(1)Pathway ID:通路编号;(2)Pathway Description:通路名称;(3)Number:富集到该通路的基因/转录本数目;(4)Ratio_in_study:该Pathway在目标基因集中占有的比例,分子为基因集中富集到该Pathway的基因/转录本数目,分母为该基因集中具有Pathway注释的基因/转录本总数目;(5)Ratio_in_pop:该Pathway在背景基因/转录本(测序得到的所有基因/转录本)中占有的比例,分子为所有背景基因/转录本中富集到该Pathway的数目,分母为所有背景基因/转录本中具有Pathway注释的总数目;(6)Pvalue:矫正后的Pvalue值,代表富集出来的结果是否具有统计学上的显著意义,P值越小,在统计学上就越有显著意义。
示例文件2:输入Pvalue类型的KEGG富集分析表,示例如下:
备注:(1)Pathway ID:通路编号;(2)Pathway Description:通路名称;(3)Number:富集到该通路的基因/转录本数目;(4)Ratio_in_study:该Pathway在目标基因集中占有的比例,分子为基因集中富集到该Pathway的基因/转录本数目,分母为该基因集中具有Pathway注释的基因/转录本总数目;(5)Ratio_in_pop:该Pathway在背景基因/转录本(测序得到的所有基因/转录本)中占有的比例,分子为所有背景基因/转录本中富集到该Pathway的数目,分母为所有背景基因/转录本中具有Pathway注释的总数目;(6)Pvalue:未经校正的P值,代表富集出来的结果是否具有统计学上的显著意义,P值越小,在统计学上就越有显著意义。
④绘图方式:支持以交集+并集+目标KEGG Pathway ID三种形式绘图。当选择“以交集展示”的时候,需要选择“展示顺序”即按照哪个KEGG富集分析表的P值进行排序;当选择“以目标KEGG Pathway ID展示”的时候,需要输入目标KEGG Pathway ID,中间以英文状态的逗号隔开。
③显著性水平:默认0.05,范围为[0,1],显著性P值越小越富集越显著。
④显示数目:默认20,及只显示富集程度前20的KEGG Pathway,可手动修改显示数目。
3.结果解读:
KEGG富集气泡图
富集气泡图的结果是一张通过数值,颜色,图形大小等直观指标展示富集功能目标基因情况的图形。它主要通过以下四个不同维度对结果进行展示:
Y轴标签:代表KEGG Pathway名称;
X轴标签:富集因子(Rich Foctor);富集因子的计算公式:目标基因集中属于这个KEGG Pathway的基因的数量÷背景基因集中这个KEGG Pathway所有基因的数量。
气泡大小:目标基因集中属于这个KEGG Pathway的基因数量,点越大,特定KEGG Pathway中的基因数目越多。
气泡颜色:富集显著性,即Pvalue或Padjust数值的大小,P值越小越显著。
4.重要提示:
本工具为绘制气泡图,用于展示富集分析结果中P值最小的前N个功能或者通路。外来数据格式不兼容时,请使用本工具前,按照输入示例文件格式对数据进行修改。
Q1:文件如何上传?
①工具数据可上传至我的数据→工具数据→personal文件夹。
②点击右上方“上传文件”即可上传本地文件至平台,在personal文件夹下也可新建文件夹。
Q2:上传的文件如何删除?
勾选文件/文件夹,点击右上方的文件操作,选择删除文件,文件也可移动或复制。
Q3:运行工具时选择好上传的文件后,无法进入下一步?
由于显示器分辨率的不同,弹出框展示可能不全,正常展示如下图所示,选择文件后,弹出框右下角为【确定】按钮,您可以按住ctrl键向下滑动鼠标缩小页面至窗口显示完全。
Q4:云工具的运行结果怎么查找?
我的分析→工具总览可查看所有运行的工具任务。点击【结果】查看分析结果报告,点击【下载文件】可下载结果文件至本地保存。