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1.工具概述:
miRNA是生物体内一类重要的特殊调控非编码RNA分子,通过多种途径(包括mRNA降解、翻译抑制、异染色质形成等)对基因的表达进行调控,从而在细胞的生长分化和生物个体的发育、代谢及疾病的发生等过程中发挥重要作用。miRNA通过对其靶基因的转录后调控行使功能,miRNA的功能研究其实就是对靶基因的功能研究,一个miRNA可能调控多个靶基因,同一靶基因也可能受到多个不同种类的miRNA调控。在动物和植物中miRNA的产生和调控机制不同:动物miRNA依靠种子序列(5'端2-8 nt)与靶基因的3'非编码区(3' UTR)紧密结合,抑制靶mRNA翻译;植物miRNA整条序列与靶基因的mRNA紧密结合,诱导靶mRNA的降解。因此miRNA的靶基因预测方法在动、植物有所区分:
动物:miRanda、TargetScan、RNAhybrid
植物:psRobot、targetfinder、RNAhybrid
2.操作方法:
①任务名称:对本次小工具运行任务进行命名,方便后续任务查找及分析结果查看。
②miRNA序列文件:必填参数,需要进行靶基因预测的miRNA序列,fa格式。
示例文件:miRNA.fa
③靶RNA序列文件:必填参数,候选靶标RNA序列,fa格式。
示例文件:targetgene.fa
④物种选择:可根据上传序列选择对应的物种(动物或者植物)进行分析,保证预测结果的准确性。
⑤预测软件:因为miRNA的靶基因预测方法在动、植物有所区分,动物:miRanda、TargetScan、RNAhybrid,植物:psRobot、targetfinder、RNAhybrid;可选择多款软件进行预测。
⑥预测标准:当预测软件选择多款软件分析时,可选择是否取多种靶标预测结果的交集作为miRNA的靶基因输出结果。
3. 结果解读:
详细数据结果请自行去文件处下载,输出结果包含具有靶向关系的miRNA和靶RNA的名称编号;miRNA匹配靶基因起始位置;靶基因预测结果得分,值越大越可靠;miRNA与靶基因结合的自由能,值越小结合越稳定;miRNA与靶基因的比对序列等等信息。
4.参考文献:
[1] Enright A J, John B, Gaul U, et al. MicroRNA targets in Drosophila[J]. Genome Biology, 2003, 5(1).
[2] Agarwal V, Bell G W, Nam J, et al. Predicting effective microRNA target sites in mammalian mRNAs[J]. eLife, 2015.
[3] Wu H, Ma Y, Chen T, et al. PsRobot: a web-based plant small RNA meta-analysis toolbox[J]. Nucleic Acids Research, 2012: 22-28.
Q1:文件如何上传和删除?
①通过云工具页面上的选择文件按钮可以上传本地文件到云工具文件夹中,上传成功后可以直接选择目的文件进行分析。
②可以在项目中心——工具数据——我的云工具文档 文件夹中查看、上传和删除云工具文件。
Q2:运行成功的任务在哪里查看结果?
投递运行的任务可以在项目中心——我的工具任务 中查看运行状态和结果,点击“结果”可查看页面运行结果,点击“文件”可查看结果文件夹,如果运行失败可以点击“排查”查看报错原因。部分工具没有结果按钮只有文件按钮。
Q3:云工具任务如何删除?
运行失败或不需要的任务可以在项目中心——我的工具任务中勾选后删除,删除的文件会在回收站保存30天,期间可随时复原。